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甘油三酯又稱中性脂肪，由于其甘油骨架上分別結(jié)合了3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸，相應(yīng)稱為甘油三酯（TG）、甘油二酯（DG）和甘油一酯（MG）。血清中90%～95%是TG，TG中結(jié)合的脂肪酸分別為油酸（44%）、軟脂酸（26%）、亞油酸（16%）和棕櫚油酸（7%）。

血清TG測(cè)定方法一般分為物理化學(xué)法、化學(xué)法及酶法三大類。

血清中TG的化學(xué)組成并不單一，準(zhǔn)確求其分子較為困難。因標(biāo)準(zhǔn)不同，測(cè)定結(jié)果存在差異。化學(xué)法多采用三棕櫚精（軟脂精）（分子量807.3）、三油精（分子量895.4）為標(biāo)準(zhǔn)，按摩爾濃度計(jì)算。酶法測(cè)定以三油精為標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行換算。

1．化學(xué)法

化學(xué)測(cè)定法包括：①TG的抽提分離；②皂化；③甘油糖的氧化；④氧化生成甲掌顯色定量等四個(gè)階段。操作較為繁雜，影響測(cè)定因素太多，本法準(zhǔn)確性差，一般很少用。

2．酶法測(cè)定

酶法測(cè)定包括：①TG的抽提與皂化；②加水分解生成甘油糖定量等二個(gè)階段。目前常規(guī)檢測(cè)應(yīng)用的方法有甘油激酶（glycerolkinase,GK）法和甘油氧化酶（glycerol Oxidase,GOD）法。操作簡(jiǎn)便，快速準(zhǔn)確，并能在自動(dòng)化生化分析儀上進(jìn)行批量測(cè)定。

1．原理

血清中加入異丙醇抽提取甘油三酯，經(jīng)KOH皂化使甘油三酯水解生成甘油及脂肪酸，甘油在過(guò)碘酸作用下氧化成甲醛，在氯離子存在下甲醛與乙酰丙酮縮合生成黃色的3，5二乙酰，1，4二氫甲基吡啶，其顏色的深淺與甘油三酯的含量成正比，420nm測(cè)定定量。該法可用于基本功訓(xùn)練及組織細(xì)胞TG的提取測(cè)定。

2．試劑組成

3．操作

按圖15-3操作。

圖15-3 血清甘油三酯（乙酯丙酮法）測(cè)定操作圖

4．計(jì)算

血清TG濃度=E_SA/E_ST×1.13(mmol/L)

血清中甘油三酯經(jīng)脂肪酶水解為甘油和脂肪酸，甘油在甘油激酶（GK）及ATP存在下，生成3-磷酸甘油，爾后，在磷酸甘油氧化酶（GPO）作用氧化成磷酸二羥丙酮并生成H₂O₂，H₂O₂與底物4-氨基安替比林和ESPAS在過(guò)氧化物酶（POD）作用下，生成紅色亞醌化合物（quinoneimine），比色（500nm），其顏色深淺與甘油三酯含量成正比。

（一）手工測(cè)定法

1．試劑組成

*：一般采用商品試劑盒

圖15-4 血清甘油三酯測(cè)定法（酶法）操作圖

2．操作

按圖15-4操作。

3．計(jì)算

血清TG濃度=E_SA/E_ST×2.26(mmol/L)

（二）生化分析儀檢測(cè)

全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定操作（以CL-7200型為例）。

1．試劑

A液：GK，GPO，4-AA-P、抗壞血酸氧化酶等。

B液：POD，Lipase,ESPAS等。

標(biāo)準(zhǔn)液：甘油三油酸酯 200mg/dl(2.26mmol/L)。

2．上機(jī)參數(shù)

3．操作過(guò)程

4．計(jì)算

以△A=A2-A1并根據(jù)同樣之標(biāo)準(zhǔn)或質(zhì)控物計(jì)算，自動(dòng)打印結(jié)果。

5．注意事項(xiàng)

①試劑與樣本量可根據(jù)分析儀要求按比例改變。

②試劑在有效期內(nèi)2～8℃避光保存。

③樣本中甘油三酯含量超過(guò)11mmol/L需用生理鹽水稀釋后再測(cè)。