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1　免疫及攻擊

用生理鹽水將吸附破傷風(fēng)類毒素標(biāo)準(zhǔn)品和待檢樣品以2倍稀釋法稀釋成3～5個(gè)稀釋度（中間的稀釋度必須在攻毒后能保護(hù)約半數(shù)動(dòng)物）。每一稀釋度樣品免疫體重14～16g小白鼠14只（或250～350g豚鼠至少10只）。另外10只小白鼠不注射作為對(duì)照（另外5只豚鼠不注射作為對(duì)照）。免疫4周，每只免疫小白鼠攻擊破傷風(fēng)毒素50LD₅₀(免疫豚鼠攻擊100LD₅₀)，皮下注射0.5ml。對(duì)照組健康小白鼠注射25倍稀釋的上述毒素（對(duì)照組豚鼠注射100倍稀釋的上述毒素），每只皮下注射0.5ml，攻擊后觀察5日，每日記錄結(jié)果。

2　試驗(yàn)成立應(yīng)具備的條件

（1）檢品的最低稀釋度能保護(hù)半數(shù)以上動(dòng)物。

（2）檢品的最高稀釋度能保護(hù)半數(shù)以下動(dòng)物。

（3）對(duì)照組動(dòng)物應(yīng)部分死亡而不全部死亡。

（4）檢品和標(biāo)準(zhǔn)品的劑量反應(yīng)曲線在平行性及直線性上沒有太大的偏差。

3　結(jié)果計(jì)算

用平行線分析法進(jìn)行結(jié)果計(jì)算。

4　結(jié)果判定

待檢樣品的效價(jià)每個(gè)劑量應(yīng)不少于40IU。如95%可信限大于50%～200%則95%可信限的低限效價(jià)應(yīng)大于40IU/1個(gè)人用劑量。