凍干人凝血因子Ⅷ濃制劑制造及檢定規程
本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的新鮮血漿分離、提純、凍干并經病毒滅活制成。主要成份為人凝血因子Ⅷ及少量纖維蛋白原，含適量枸櫞酸鈉，不含防腐劑。本品對缺秒人凝血因子Ⅷ所致的凝血機能缺陷具有糾正作用，專供防治甲型血友病患者的出血癥狀。
1 制造
1.1制造要求
1.1.1 對血漿的要求
1.1.1.1所用之血漿來源應符合《原料血漿采集（單采血漿術）規程》要求，血漿應無凝塊、無纖維蛋白析出，非脂血，無溶血。在采集時應減少皮膚損傷，保持血流通暢，并與抗凝劑充分混合，用塑料袋采集。新鮮分離液體血漿或新鮮冰凍血漿及凍結冷沉淀，均可用于生產。
1.1.1.2分離后的血漿應保持無菌，并應及時冰凍保存。自采血到凍結一般在8小時內完成。液體血漿應在4±2℃貯放，貯放時間應不超過小時，最長不得超過12小時。冰凍血漿（-30℃以下）保存期不超過6個月。
1.1.2 對制造工作室、設備及原材料的要求，與《人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規程》中1.1.3～1.1.4項要求相同。
1.2 制造工藝
1.2.1 采用低溫乙醇法或凍融法制得冷沉淀，經抽提、吸附、精制，亦可采用經衛生部批準的其他工藝制備，并經衛生部批準的適宜方法進行病毒滅活處理。
1.2.2 分批
同一制造工藝、同一容器混合的制品作為一批，不同濾器和不同機柜凍干的制品分為亞批。
1.2.3 穩定劑及防腐劑
制品內允許加穩定劑，制品應不含防腐劑。
1.2.4除菌過濾及分裝
本品應用微孔薄膜過濾，可直接分裝無菌的成品瓶內，每瓶裝量根據效價及規格確定。
1.2.5 半成品檢定
每批半成品應進行效價測定及熱原質試驗，并按亞批做無菌試驗。
1.2.6 凍干
除菌過濾分裝的制品經外觀檢查后立即凍結，并按《人血白蛋白（低溫乙醇法）制造及檢定規程》1。2。5項規定進行凍干，但制品溫度不得超過35℃。
1.3 規格
每瓶含人凝血因子Ⅷ的效價可有50、100、200、300、400IU五種，制品的效價應標示在瓶簽及包裝上。
2 成品檢定
2.1抽樣
每批制品應抽樣作全面質量檢定，不同機柜凍干的制品分別抽樣做無菌試驗和水分測定。
2.2 物理檢查
2.2.1 外觀
應為乳白色疏松體，無融化跡象。溶解后溶液澄清或輕微乳光，允許有微量細小蛋白顆粒。
2.2.2 真空度
以高頻火花真空測定器檢測，瓶內應出現藍紫色輝光。
2.2.3 溶解時間
從冰箱取出的制品應先平衡至25～37℃，然后按瓶簽標示量加入適量30～37℃滅菌注射用水，使其每ml含4IU。制品應于30分鐘內溶解。
2.3 化學檢定
按《生物制品化學檢定規程》進行。
2.3.1 水分
水分含量應≤3%（g/g）。
2.3.2pH值
取2.2.3項下溶解在20±2℃測定，pH值應為6.8～7.6。
2.3.3 鈉離子測定
取2.2.3 項下溶液測定，鈉離子含量應≤160mmol/L。
2.3.4枸櫞酸離子測定
取2.2.3項下溶液測定，如加枸櫞酸鈉作穩定劑，其枸櫞酸離子含量應≤25mmol/L。
2.4 效價測定
取2.2.3項下溶液用一步或二步法（見附錄）進行測定，每瓶所含人凝血因子Ⅷ的效價應不低于標示量的80%。
2.5 比活性
每mg蛋白質所含人凝血因子Ⅷ的效價應≥0.25IU。
2.6HBsAg檢測
用敏感性為1ng/ml以下的試劑盒檢測，應為陰性。
2.7 抗HCV檢測
用敏感的方法檢測，應為陰性。
2.8抗HIV-1及2檢測
用敏感的方法檢測，應為陰性。
2.9 無菌試驗
樣品溶解后按《生物制品無菌試驗規程》進行。
2.10 安全試驗
2.10.1 豚鼠試驗
用體重300～400g健康豚鼠2只，每只腹腔注射檢品15IU，注射后半小時內動物不應有明顯的異常反應，觀察7天，動物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用4只豚鼠復試一次，判定標準同前。
2.10.2 小白鼠試驗
用體重18～20g小白鼠5只，每只腹腔注射檢品1.5IU，半小時內動物不應有明顯的異常反應，繼續觀察7天，動物均健存，每只體重增加者判為合格。如不符合上述要求，用10只小白鼠復試一次，判定標準同前。
2.11 熱原質試驗
按《生物制品熱原質試驗規程》進行，注射劑量按家兔體重注射10IU/kg。判定標準按該4.2項要求進行。
2.12 鑒別試驗
用免疫雙擴散法，僅與抗人的血清產生沉淀線，與抗馬、抗牛血清不產生沉淀線。
2.13根據病毒滅活方法，必要時應增加相應的檢定項目。
3 保存與效期
應嚴格保存于10℃以下避光干燥處，運輸期間亦應冷藏。效期自效價檢定合格之日起為2年。