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1　菌種

1.1　需氧菌

乙型溶血性鏈球菌（32210株），短芽胞桿菌（7316株）。

1.2厭氧菌

生孢子梭狀芽胞桿菌（64941株）。

以上菌株均由中國藥品生物制品檢定所分發(fā)。

2　培養(yǎng)基

凡應(yīng)用于無菌試驗的培養(yǎng)基（增菌和試驗用）都應(yīng)進(jìn)行靈敏度試驗。

3　操作

3.1　不應(yīng)在同一無菌操作室內(nèi)同時操作2個菌株。

3.2　將菌種接種于適宜的培養(yǎng)基，經(jīng)30～35℃培育一定時間（乙型溶血性鏈球菌和生孢子梭狀芽胞桿菌培育24～48小時，短芽胞桿菌培育18～20小時）后，將乙型溶血性鏈球菌和短芽胞桿菌分別刮入滅菌的生理鹽水內(nèi)制成均勻菌液，生子孢梭狀芽胞桿菌先將菌液吸入滅菌的試管內(nèi)，再用滅菌生理鹽水稀釋適宜濃度制成均勻菌液，再將菌液稀釋至與標(biāo)準(zhǔn)比濁管相同之濃度。然后用0.1%蛋白胨水作10倍系列稀釋。

3.3　將10^-6～10^-8（短芽胞桿菌、生子孢梭狀芽胞桿菌為10^-6～10^-8，乙型溶血性鏈球菌為10^-7～10^-9）菌液各1ml分別接種到9ml（用于厭氧菌的培養(yǎng)基在試管中裝置高度不得低于7cm）試驗用培養(yǎng)基中，每個稀釋度至少接種3管，并用未接種的培養(yǎng)基做對照，將接種乙型溶血性鏈球菌、生子孢梭狀芽胞桿菌的培養(yǎng)基，置30～35℃培育3天，接種短芽胞桿菌的培養(yǎng)基培育5天，記錄結(jié)果。

4　結(jié)果判定

以接種后培養(yǎng)基管數(shù)的2/3以上呈現(xiàn)生長的最高稀釋度為該培養(yǎng)基的靈敏度，3次試驗中，以2次達(dá)到的最高靈敏度為判定標(biāo)準(zhǔn)。