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本方法適用于白喉、破傷風(fēng)、氣性壞疽、肉毒等抗毒素生產(chǎn)。

1　馬匹

1.1用于免疫采血的馬匹必須符合《生物制品用馬匹檢疫及管理規(guī)程》的規(guī)定。新馬檢疫期間的免疫采血必須與正常生產(chǎn)分開。

1.2馬匹一經(jīng)發(fā)現(xiàn)有傳染病或其他嚴(yán)重疾患時(shí)，必須立即停止免疫采血。

1.3免疫不成功的馬匹可轉(zhuǎn)其他種類免疫或予以淘汰。

1.4用于抗毒素生產(chǎn)的馬匹不得使用青霉素或鏈霉素。

2　抗原與佐劑

2.1免疫用抗原應(yīng)選用免疫原性好的精制類毒素或類毒素。必要時(shí)也可用脫毒不完全或未經(jīng)脫毒的抗原免疫。

2.2種類不同的抗原應(yīng)作明顯的標(biāo)記，予以嚴(yán)格區(qū)分。

2.3抗原應(yīng)妥善保存于2～8℃冷暗處，分裝和調(diào)制應(yīng)在無(wú)菌操作下進(jìn)行，凡發(fā)現(xiàn)染菌者應(yīng)予廢棄。

2.4凡裝過(guò)脫毒不完全或未經(jīng)脫毒抗原的容器和注射器等須經(jīng)消毒處理后洗刷。

2.5免疫用佐劑應(yīng)優(yōu)質(zhì)、安全、高效、無(wú)抗原性，并不得含人體成份。

3　免疫及采血

操作時(shí)嚴(yán)格進(jìn)行核對(duì)，采血應(yīng)盡可能在無(wú)菌條件下進(jìn)行。

3.1基礎(chǔ)免疫

馬匹在超免疫前應(yīng)給予基礎(chǔ)免疫，可按各自的條件和經(jīng)驗(yàn)制定實(shí)施計(jì)劃進(jìn)行。

3.2超免疫

根據(jù)基礎(chǔ)免疫和前程免疫的具體情況，制定有效的免疫及采血計(jì)劃。

3.3采血及血漿分離

3.3.1　免疫成功的馬匹可進(jìn)行采血，其血清的效價(jià)不得低于下列要求：

免疫種類　采血時(shí)血清最低效價(jià)（IU/ml）

破傷風(fēng)1100

白喉1100

威氏300

水腫700

膿毒350

溶組織700

A型肉毒1500

B型肉毒800

E型肉毒800

采血量，應(yīng)根據(jù)馬匹體重及健康狀況，一般每kg體重采血14～20ml。

3.3.2采血馬匹應(yīng)于采血前至少6小時(shí)以內(nèi)不喂給精料。黃疸嚴(yán)重及其他重患病馬均不得采血。

3.3.3所采血液應(yīng)含適宜的抗凝劑。

漿應(yīng)做效價(jià)測(cè)定并抽樣做無(wú)菌試驗(yàn)。血漿應(yīng)加適宜的防腐劑（例如不超過(guò)0.5%的苯酚等），保存于冷暗處。

3.3.5分離血漿時(shí)，應(yīng)注意不混入血細(xì)胞。發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重溶血或嚴(yán)重黃疸者不應(yīng)混并。

3.3.6新馬在檢疫期間所采的免疫血漿應(yīng)單分離單保存，至檢疫期滿合格后方可用于生產(chǎn)。

3.3.7患傳染性貧血的馬匹，應(yīng)追查，前次檢疫以后的血漿及被該血漿所污染的半成品及成品應(yīng)予廢棄。患惡性腫瘤或馬鼻疽的馬匹，應(yīng)追查，發(fā)現(xiàn)前3個(gè)月內(nèi)的血漿及被該血漿所污染的半成品及成品應(yīng)予廢棄。

3.3.8凡與血液及血漿直接接觸的器皿、用具及溶液等均應(yīng)無(wú)菌，并應(yīng)注意不染有熱原質(zhì)或含有毒性物質(zhì)。

3.3.9加入血液或血漿中的化學(xué)試劑，其規(guī)格應(yīng)不低于化學(xué)純（三級(jí)純）或符合《中國(guó)生物制品主要原材料試行標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定。

4　效價(jià)測(cè)定

馬匹免疫效價(jià)及血漿的效價(jià)，可采用適宜的方法測(cè)定，其結(jié)果應(yīng)與《精制抗毒素制造及檢定規(guī)程》所附各有關(guān)的《抗毒素效價(jià)測(cè)定方法》測(cè)定的結(jié)果相符合。