附錄2 抗凝劑、分血漿袋及采血器的熱原質(zhì)檢查
采用家兔法。亦可用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法,有異議時用家兔法仲裁。
1 家兔法
按《生物制品熱原質(zhì)試驗(yàn)規(guī)程》進(jìn)行,判定標(biāo)準(zhǔn)按該規(guī)程4.2項(xiàng)要求進(jìn)行,其抽樣方法與注射劑量如下:
1.1 抗凝劑
按家兔體重2ml/kg注射。
1.2 采血器及分血漿器
采血器及分血漿器應(yīng)有批號,每批抽一定數(shù)量進(jìn)行檢查,方法為用100ml氯化鈉注射液通過,檢查流過液,應(yīng)無肉眼可見的混濁或異物,注射劑量按家兔體重10ml/kg注射,合格后方能使用。
1.3 分血漿袋
抽取分血漿袋10只,用100ml氯化鈉注射液清洗,檢查清洗液,應(yīng)無肉眼可見的混濁和異物,按家兔體重10ml/kg注射。
2 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法
2.1 試驗(yàn)要求
2.1.1 用具處理
試驗(yàn)所用器皿需除去可能存在的外源性內(nèi)毒素,常用的方法是250℃至少30分鐘或180℃至少2小時干烤。
2.1.2 鱟試劑靈敏度復(fù)核
根據(jù)鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值(λ)將細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品,用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解,在旋渦混合器上混合15分鐘,然后制備成合適的2倍稀釋濃度,即2λ、λ、0.5λ、0.25λ備用,每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混合30秒鐘,按2.2項(xiàng)試驗(yàn),每一稀釋液平行做4管,如最高濃度4管均為陽性,最低濃度4管均為陰性,按下式計(jì)算鱟試劑靈敏度測定值(λc)。
Λc=log-1(ΣΧ)/4
X為反應(yīng)終點(diǎn)內(nèi)毒素濃度的對數(shù)值。
當(dāng)λc在0.5~2.0λ(包括0.5λ和2.0λ)時,方可用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查,并以λc為該批鱟試劑的靈敏度。每批新的鱟試劑在用于試驗(yàn)前都要進(jìn)行靈敏度的復(fù)核。
2.1.3 供試品干擾試驗(yàn)
按2.1.2項(xiàng)試驗(yàn),用供試品的最大有效稀釋液將細(xì)菌內(nèi)毒素國家標(biāo)準(zhǔn)品制成2.0λ、0.5λ、0.25λ濃度稀釋液。供試品的最大有效稀釋倍數(shù)(D)按下式計(jì)算:
D=L/λ
L為供試品的細(xì)菌內(nèi)毒素限值(EU/ml)。
如果有供試品和無供試品測得的鱟試劑靈敏度(λc)在0.5~2.0λ(包括0.5λ和2.0λ)時,則認(rèn)為供試品在該濃度下不干擾試驗(yàn),否則需要進(jìn)行適當(dāng)處理后重復(fù)本試驗(yàn)。使用更靈敏的鱟試劑,對供試品進(jìn)行更大的倍數(shù)稀釋,是排除干擾的簡單有效方法。
2.1.4 供試品
2.1.4.1 抗凝劑
取原液作160倍稀釋后測定。原液細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤5.56EU/ml。
2.1.4.2 采血漿器及分血漿器
取1.2項(xiàng)流過液測定。細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤0.5EU/ml。
2.1.4.3 分血漿袋
取1.3項(xiàng)清洗液測定。細(xì)菌內(nèi)毒素含量應(yīng)≤0.5EU/ml。
2.2 方法
取裝有0.1ml鱟試劑溶液的10×75mm試管(或0.1ml/支規(guī)格的鱟試劑原安瓿)4支,其中2支加入0.1ml供試品作為供試管,1支加入2λ內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.1ml作為陽性對照管,1支加入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水0.1ml作為陰性對照管。將試管中溶液輕輕混勻后,封閉管口,垂直放入37±1℃水浴中,保溫60±2分鐘。保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到振動造成假陰性結(jié)果。
2.3 結(jié)果判定
將試管從水浴中輕輕取出,緩緩倒轉(zhuǎn)180°時,管內(nèi)凝膠不變形,不從管壁滑脫者為陽性,記錄為(+);凝膠不能保持完整并從管壁滑脫者為陰性,記錄為(-)。供試品兩管均為(-)應(yīng)認(rèn)為符合規(guī)定;如兩管均為(+),應(yīng)認(rèn)為不符合規(guī)定;如兩管中1管為(+),1管為(-),按上述方法另取4管供試品管復(fù)試,4管中有1管為(+),即認(rèn)為不符合規(guī)定。陽性對照為(-)或陰性對照為(+),試驗(yàn)無效
- 周易
- 史記
- 老子
- 左傳
- 六韜
- 孫子兵法
- 論語
- 易傳
- 孟子
- 大學(xué)
- 中庸
- 尚書
- 禮記
- 周禮
- 儀禮
- 莊子
- 墨子
- 荀子
- 列子
- 管子
- 吳子
- 素書
- 孝經(jīng)
- 將苑
- 反經(jīng)
- 冰鑒
- 論衡
- 智囊
- 漢書
- 后漢書
- 韓非子
- 淮南子
- 尉繚子
- 山海經(jīng)
- 二十四孝
- 千字文
- 鬼谷子
- 傷寒論
- 商君書
- 戰(zhàn)國策
- 三國志
- 司馬法
- 三十六計(jì)
- 夢溪筆談
- 菜根譚
- 聲律啟蒙
- 文心雕龍
- 孫臏兵法
- 笑林廣記
- 公孫龍子
- 百戰(zhàn)奇略
- 顏氏家訓(xùn)
- 孔子家語
- 呂氏春秋
- 天工開物
- 世說新語
- 了凡四訓(xùn)
- 本草綱目
- 黃帝內(nèi)經(jīng)
- 詩經(jīng)
- 資治通鑒
- 水經(jīng)注
- 弟子規(guī)
- 逸周書
- 金剛經(jīng)
